乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）

【產品名稱】

通用名稱：康珠生物乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）

英文名稱：Japanese encephalitis virus IgG antibody detection kit (ELISA)

【包裝規格】

96人份／盒 ，48人份／盒。

【預期用途】

本產品用于體外定性檢測人體血清、血漿或指尖末梢血中的乙型腦炎病毒IgG抗體。

流行性乙型腦炎是乙型腦炎病毒經庫蚊傳播而使人體感染的一種傳染性疾病，感染患者以2-6歲兒童居多，病死率較高為5%-20%。人體感染該病毒后，能引起中樞神經系統癥狀，發生腦炎而俗稱乙型腦炎，應用乙型腦炎抗體的穩定，很少變異的特點。預防免疫效果良好，所以通過免疫接種乙型腦炎病毒疫苗，使機體產生乙型腦炎病毒IgG抗體，達到乙型腦炎的預防效果。

【檢驗原理】

本試劑盒采用酶聯免疫間接法原理，用經滅活純化的乙型腦炎病毒抗原包被酶標板制備固相抗原，樣本中乙型腦炎病毒IgG抗體與包被抗原反應，再與辣根過氧化物酶標記的鼠抗人IgG結合, 形成抗原-抗體-酶標抗體復合物，加入底物TMB后產生顯色反應，加入終止液后經酶免分析儀測定OD值，再與臨界值比較以判定樣本中是否含有乙型腦炎病毒IgG抗體。

【主要組成成份】

本試劑盒由反應板、酶結合物、陽性對照、陰性對照、濃縮洗滌液、顯色液A、顯色液B、終止液、樣品稀釋液、自封袋和封片組成：

【儲存條件及有效期】

試劑盒應置2～8℃保存，有效期為十二個月。

生產日期、有效期至：見包裝標簽。

【適用儀器】

酶免分析儀(檢測波長450nm,參考波長630nm)、洗板機、37℃恒溫水浴箱、移液器、振蕩器。

【樣本要求】

1. 血清樣本按常規方法由靜脈采集。血漿樣本可采用常規用量的抗凝劑（EDTA-2Na: 12g/L、肝素:15000IU/L、枸椽酸鈉：3.2g/L、草酸鈉: 0.01mol/L（1.34g/L））抗凝。

2.樣本應新鮮，避免反復凍溶及溶血。樣本可在2-8℃保存一周，長期保存應于-20℃條件下儲存。

3.指尖末梢血樣本按照常規方法采集，指尖末梢血樣本可采用常規用量的抗凝劑（EDTA-2K）抗凝。指尖末梢血樣本取20μL加入樣本稀釋液120μL，靜置取上清液。

【檢驗方法】

加樣：加血清或血漿樣本時每孔先加入樣本稀釋液100μL，再加入待測樣本10μL，輕輕振勻?；蛘呒又讣饽┥已獦颖緯r，取20μL加入樣本稀釋液120μL，輕搖混勻，置室溫或2～8℃冰箱靜置，待紅血球全部沉降到管底后取上清液進行檢測，每孔加入上清液100μL，輕輕振勻。

每次試驗設陰性對照、陽性對照各2孔，每孔加入相應對照血清100微升，并設空白對照1孔(暫不加任何液體)。

2.溫育：用封片封板后，37℃溫育60分鐘。

3.洗板：將濃縮洗滌液用純化水或雙蒸水稀釋20倍，設定洗板5次程序，每次浸泡時間為（30～60）秒，洗板結束后在吸水紙上拍干。

4.加酶：除空白對照孔外，每孔加入酶結合物50微升。

5.溫育：用封片封板后，37℃溫育30分鐘。

6.洗板：同步驟3。

7.顯色：每孔加入顯色液A、顯色液B各50微升，用封片封板后，輕輕振勻，37℃避光顯色15分鐘。

8.終止：每孔加終止液50微升，輕輕振勻。

9.測OD值：對空白對照調零，在酶標儀450nm處測定OD值，或在雙波長450nm/630nm處測定OD值。

10.結果分析：當使用單波長（450nm）測定時應扣除空白值，當使用雙波長測定不應扣除空白值。

【參考值（參考范圍）】

臨界值 cutoff value=0.10+陰性對照平均值（不到0.05按0.05算，超過0.05按實際值平均值計算。）

【檢驗結果的解釋】

樣本OD值＜臨界值時，為陰性結果：表示待測樣本中未檢出乙型腦炎病毒IgG抗體；

樣本OD值≥臨界值時，為陽性結果：表示待測樣本標本中檢出乙型腦炎病毒IgG抗體，說明既往感染或已經過乙型腦炎疫苗的計劃免疫。

【檢驗方法的局限性】

1.高靈敏度的免疫實驗方法，存在潛在的非特異性反應。

2.檢測高度溶血的樣本和有微生物污染的樣本時可能會有錯誤的結果。

3.本檢測結果僅供臨床參考，如需確診病例請結合臨床癥狀及其他檢測手段，不得作為臨床診斷的唯一標準。